PRAKTEK ISOLASI | asalshareinfo

PRAKTEK ISOLASI

Judul : Melakukan Isolasi 

Tujuan : 

1.    Melakukan cara isolasi mikroba (memisahkan mikroba dari campurannya) 

2.    Melakukan inokulasi (penanaman) mikroba 

3.    Mengenal bentuk-bentuk koloni bakteri (melakukan identifikasi mikroba) 

     a.   Bahan 

           Media PDA 

           Media EMB 

           Media SSA 

           Media NB 

           Daging 

           Kapang 

           Air Selokan 

           Lactobacillus

     b.   Alat (Isilah Gambar Alat pada Tabel di Bawah ini!) 

GAMBAR ALAT	NAMA ALAT
	MIKROSKOP
	JARUM OSE
	BUNSEN
	KACA PREPARAT
	TABUNG REAKSI
	CAWAN PETRI
	ERLENMEYER

c.   Prosedur kerja 

     1. Cara Isolasi dengan Metode Penggoresan (the streak plate technique) 

       Siapkan media yang sudah disterilkan dalam petridish yang steril, biarkan sampai dingin 

       Ambillah 1 ose suspensi dari campuran dan goreslah kepermukaan media. Maksud dari goresan ini untuk                           mendapatkan deretan koloni yang dikehendaki dan memudahkan isolasi selanjutnya 

       Inkubasi selama 24-28 jam, amati koloni yang terbentuk 

       Isolasikan masing-masing koloni dengan menanamkannya pada masing-masing medianya 

       Isolasi ini dikerjakan 2-3 kali, sampai diperoleh kultur murni 

       Bila telah mendapatkan kultur murni, inokulasikan kedalam media agar dalam tabung reaksi   

      2.  Cara Inokulasi dalam Nutrient Broth 

       Ambilah koloni B.subtilis/E.coli dengan ose steril (sebelumnya dipijarkan pada burner dan didinginkan sebentar),             masukkan kedalam nutrient broth. 

       Sebaiknya inokulasi delakukan dekat burner di dalam ruangan steril. Tangan kanan untuk memegang ose dan                     tangan kiri digunakan untuk memegang tabung reaksi steril yang berisi media nutrient broth steril. Sebelum dan               setelah diinokulasi, bibir tabung reaksi dilewatkan diatas burner, (kapas penutup jangan diletakkan meja) 

       Inkubasi selama 24-48 jam pada suhu kamar, amati gelembung/kekeruhan yang terjadi secara makroskopis dan                   secara mikroskopis  

    3.  Cara Inokulasi dalam Nutrient Agar 

      Media nutrient agar tegak diinokulasi secara aseptik dengan biakan murni bakteri memakai jarum ose dengan cara               menusuk kedalam nutrient agar 

      Media nutrient agar miring diinokulasi secara aseptik dengan biakan murni bakteri memakai jarum ose dengan                   cara menggoreskan bagian atas nutrient agar (goresan lurus) 

      Inokulasi dalam cawan petri steril dilakukan dengan metode penggoresan atau metode taburan 

      Metode taburan dilakukan sebagai berikut: sebanyak ± 10ml media nutrient agar dalam tabung reaksi (yang baru              disterilkan / dicairkan), didinginkan hingga suhu ± 50OC, kemudian diinokulasi secara aseptik dengan biakan                     murni  bakteri, kemudian tabung digojog dan dituangkan dalam cawan petri secara aseptik. Cara ini biasanya                     digunakan untuk menghitung bakteri (metode pour plate) 

      Inkubasikan selama 24-48 jam pada suhu kamar 

      Amatilah koloni-koloni yang tumbuh secara makroskopis/mikroskopis.   

Gambar 34. Teknik Menggores 

www.google.com/ imgressa 

HASIL PENGAMATAN

GAMBAR	KETERANGAN
	Inokulasi pada media EMB ·         Bentuk : ·         Warna : hijau metallic ·         Pinggiran (tepi) : ·         Permukaan (elevasi) : ·         Struktur dalam :
	Inokulasi pada media NB ·         Bentuk : ·         Warna : ·         Pinggiran (tepi) : ·         Permukaan (elevasi) : ·         Struktur dalam :
	Inokulasi pada media PDA ·         Bentuk : ·         Warna : ·         Pinggiran(tepi) : ·         Permukaan(elevasi) : Struktur dalam :
	Inokulasi pada media SSA ·         Bentuk : ·         Warna : ·         Pinggiran (tepi) : ·         Permukaan(elevasi) : ·         Struktur dalam :

3. Refleksi 

Tuliskan jawaban  pada lembar refleksi  

a. Bagaimana kesan anda selama mengikuti pembelajaran ini? 

b. Apakah anda telah menguasai seluruh materi pelajaran ini? 

c. Apa yang akan anda lakukan setelah menyelesaikan pembelajaran ini? 

d. Tuliskan secara ringkas apa yang anda pelajari pada kegiatan pembelajaran ini!

4. Tugas  

Berkunjunglah ke tempat pengusaha/ home industri pembuatan tempe. Melalui wawancara , tanyakan bagaimana cara  melakukan isolasi jamur pada proses pembuatan tempe !  Buatlah laporan dan presentasikan di depan kelas  

5. Tes Formatif 

Jawablah pertanyaan berikut ! 

a. Jelaskan peralatan untuk isolasi dan inokulasi mikroba! 

b. Jelaskan macam–macam teknik preparasi pengambilan sampel mikroba! 

c. Jelaskan ciri-ciri bakteri Gram negatif ! 

d. Buatlah alur proses pengecatan bakteri ! 

e. Jelaskan macam–macam teknik penanaman  mikroba! 

f. Bagaimana cara mendapatkan  kultur murni mikroba?